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固相萃取柱的正確操作使用指南
點(diǎn)擊次數(shù):115 更新時(shí)間:2026-03-05
   固相萃取柱是環(huán)境、食品、制藥及臨床檢測(cè)中用于樣品凈化、富集與基質(zhì)去除的核心前處理工具,通過吸附劑選擇性保留目標(biāo)物,顯著提升后續(xù)色譜或質(zhì)譜分析的準(zhǔn)確性與靈敏度。若操作不當(dāng),易因活化不充分、上樣超載、洗脫不當(dāng)或交叉污染,導(dǎo)致回收率偏低、重現(xiàn)性差甚至假陽性結(jié)果。固相萃取柱應(yīng)嚴(yán)格遵循活化到位、上樣精準(zhǔn)、洗脫高效、防污到位四大原則,確保萃得凈、取得準(zhǔn)、測(cè)得真。

 


  一、使用前準(zhǔn)備
  選擇合適填料與規(guī)格:
  C18適用于非極性化合物(如農(nóng)藥、多環(huán)芳烴);
  SAX/SCX用于離子型物質(zhì)(如生物堿、有機(jī)酸);
  柱容量(如500mg/6mL)需匹配樣品濃度,避免過載;
  溶劑兼容性確認(rèn):
  確保樣品溶劑與活化/洗脫溶劑互溶,防止填料干裂或通道形成。
  二、規(guī)范操作四步法
  1、活化:
  先用3–5mL強(qiáng)洗脫溶劑(如甲醇)潤濕填料,再用3–5mL弱溶劑(如水或緩沖液)平衡,使吸附劑處于適宜吸附狀態(tài);
  2、上樣:
  樣品以慢速(1–2mL/min)流過柱床,避免溝流;高鹽或高脂樣品需離心/過濾預(yù)處理;
  3、淋洗:
  用中等強(qiáng)度溶劑(如5%甲醇水)去除雜質(zhì),切勿洗脫目標(biāo)物;
  4、洗脫:
  用小體積強(qiáng)溶劑(如純甲醇、乙腈)分2–3次洗脫,每次浸泡30秒后重力滴落,禁止抽干柱床(尤其反相柱),以防目標(biāo)物不可逆吸附。
  三、關(guān)鍵細(xì)節(jié)控制
  全程保持填料濕潤:干柱會(huì)導(dǎo)致回收率驟降;
  使用正壓裝置時(shí),控制流速均勻;
  高通量實(shí)驗(yàn)建議使用96孔板式SPE,但需校準(zhǔn)每孔流速一致性。